Identifying the Deleterious Effect of Rare LHX4 Allelic Variants, a Challenging Issue

International audienceLHX4 is a LIM homeodomain transcription factor involved in the early steps of pituitary ontogenesis. To date, 8 heterozygous LHX4 mutations have been reported as responsible of combined pituitary hormone deficiency (CPHD) in Humans. We identified 4 new LHX4 heterozygous allelic variants in patients with congenital hypopituitarism: W204X, delK242, N271S and Q346R. Our objective was to determine the role of LHX4 variants in patients' phenotypes. Heterologous HEK293T cells were transfected with plasmids encoding for wild-type or mutant LHX4. Protein expression was analysed by Western Blot, and DNA binding by electro-mobility shift assay experiments. Target promoters of LHX4 were cotransfected with wild type or mutant LHX4 to test the transactivating abilities of each variant. Our results show that the W204X mutation was associated with early GH and TSH deficiencies and later onset ACTH deficiency. It led to a truncated protein unable to bind to alpha-Gsu promoter binding consensus sequence. W204X was not able to activate target promoters in vitro. Cotransfection experiments did not favour a dominant negative effect. In contrast, all other mutants were able to bind the promoters and led to an activation similar as that observed with wild type LHX4, suggesting that they were likely polymorphisms. To conclude, our study underlines the need for functional in vitro studies to ascertain the role of rare allelic variants of LHX4 in disease phenotypes. It supports the causative role of the W204X mutation in CPHD and adds up childhood onset ACTH deficiency to the clinical spectrum of the various phenotypes related to LHX4 mutations

Genetic landscape of a large cohort of Primary Ovarian Insufficiency : New genes and pathways and implications for personalized medicine

Background Primary Ovarian Insufficiency (POI), a public health problem, affects 1-3.7% of women under 40 yield-ing infertility and a shorter lifespan. Most causes are unknown. Recently, genetic causes were identified, mostly in single families. We studied an unprecedented large cohort of POI to unravel its molecular pathophysiology.Methods 375 patients with 70 families were studied using targeted (88 genes) or whole exome sequencing with pathogenic/likely-pathogenic variant selection. Mitomycin-induced chromosome breakages were studied in patients' lymphocytes if necessary. Findings A high-yield of 29.3% supports a clinical genetic diagnosis of POI. In addition, we found strong evidence of pathogenicity for nine genes not previously related to a Mendelian phenotype or POI: ELAVL2, NLRP11, CENPE, SPATA33, CCDC150, CCDC185, including DNA repair genes: C17orf53(HROB), HELQ, SWI5 yielding high chromo-somal fragility. We confirmed the causal role of BRCA2, FANCM, BNC1, ERCC6, MSH4, BMPR1A, BMPR1B, BMPR2, ESR2, CAV1, SPIDR, RCBTB1 and ATG7 previously reported in isolated patients/families. In 8.5% of cases, POI is the only symptom of a multi-organ genetic disease. New pathways were identified: NF-kB, post-translational regulation, and mitophagy (mitochondrial autophagy), providing future therapeutic targets. Three new genes have been shown to affect the age of natural menopause supporting a genetic link.Interpretation We have developed high-performance genetic diagnostic of POI, dissecting the molecular pathogene-sis of POI and enabling personalized medicine to i) prevent/cure comorbidities for tumour/cancer susceptibility genes that could affect life-expectancy (37.4% of cases), or for genetically-revealed syndromic POI (8.5% of cases), ii) predict residual ovarian reserve (60.5% of cases). Genetic diagnosis could help to identify patients who may benefit from the promising in vitro activation-IVA technique in the near future, greatly improving its success in treating infertility.Funding Universite? Paris Saclay, Agence Nationale de Biome?decine.Copyright (c) 2022 The Author(s). Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY-NC-ND license (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/)Peer reviewe

Familial hypercholesterolaemia in children and adolescents from 48 countries: a cross-sectional study

Background: Approximately 450 000 children are born with familial hypercholesterolaemia worldwide every year, yet only 2·1% of adults with familial hypercholesterolaemia were diagnosed before age 18 years via current diagnostic approaches, which are derived from observations in adults. We aimed to characterise children and adolescents with heterozygous familial hypercholesterolaemia (HeFH) and understand current approaches to the identification and management of familial hypercholesterolaemia to inform future public health strategies. Methods: For this cross-sectional study, we assessed children and adolescents younger than 18 years with a clinical or genetic diagnosis of HeFH at the time of entry into the Familial Hypercholesterolaemia Studies Collaboration (FHSC) registry between Oct 1, 2015, and Jan 31, 2021. Data in the registry were collected from 55 regional or national registries in 48 countries. Diagnoses relying on self-reported history of familial hypercholesterolaemia and suspected secondary hypercholesterolaemia were excluded from the registry; people with untreated LDL cholesterol (LDL-C) of at least 13·0 mmol/L were excluded from this study. Data were assessed overall and by WHO region, World Bank country income status, age, diagnostic criteria, and index-case status. The main outcome of this study was to assess current identification and management of children and adolescents with familial hypercholesterolaemia. Findings: Of 63 093 individuals in the FHSC registry, 11 848 (18·8%) were children or adolescents younger than 18 years with HeFH and were included in this study; 5756 (50·2%) of 11 476 included individuals were female and 5720 (49·8%) were male. Sex data were missing for 372 (3·1%) of 11 848 individuals. Median age at registry entry was 9·6 years (IQR 5·8-13·2). 10 099 (89·9%) of 11 235 included individuals had a final genetically confirmed diagnosis of familial hypercholesterolaemia and 1136 (10·1%) had a clinical diagnosis. Genetically confirmed diagnosis data or clinical diagnosis data were missing for 613 (5·2%) of 11 848 individuals. Genetic diagnosis was more common in children and adolescents from high-income countries (9427 [92·4%] of 10 202) than in children and adolescents from non-high-income countries (199 [48·0%] of 415). 3414 (31·6%) of 10 804 children or adolescents were index cases. Familial-hypercholesterolaemia-related physical signs, cardiovascular risk factors, and cardiovascular disease were uncommon, but were more common in non-high-income countries. 7557 (72·4%) of 10 428 included children or adolescents were not taking lipid-lowering medication (LLM) and had a median LDL-C of 5·00 mmol/L (IQR 4·05-6·08). Compared with genetic diagnosis, the use of unadapted clinical criteria intended for use in adults and reliant on more extreme phenotypes could result in 50-75% of children and adolescents with familial hypercholesterolaemia not being identified. Interpretation: Clinical characteristics observed in adults with familial hypercholesterolaemia are uncommon in children and adolescents with familial hypercholesterolaemia, hence detection in this age group relies on measurement of LDL-C and genetic confirmation. Where genetic testing is unavailable, increased availability and use of LDL-C measurements in the first few years of life could help reduce the current gap between prevalence and detection, enabling increased use of combination LLM to reach recommended LDL-C targets early in life

Attitude du médecin généraliste face au diabète de type 1 chez l'enfant et l'adolescent (diagnostic et prise en charge initale)

INTRODUCTION: Le diabète de type 1 (DT1), pathologie chronique fréquente de l'enfant dont l'incidence augmente, évolue sans traitement vers l'acidocétose diabétique (ACD), grande pourvoyeuse de morbi-mortalité. En Italie, une campagne d information a abaissé de 78% à 12,5% le taux d'ACD révélatrice de DT1. La campagne d'information en cours en France ne semble pas modifier les pratiques des médecins généralistes. OBJECTIF de L'ETUDE: Evaluer le niveau de connaissances et les pratiques diagnostiques et thérapeutiques des praticiens des Bouches-du-Rhône dans la prise en charge inaugurale du DT1. MATERIEL et METHODES: Dans cette étude épidémiologique descriptive transversale, un questionnaire était proposé aux médecins généralistes du département. Les réponses étaient codées en variables numériques pour analyse (tests Chi , seuil de significativité: 5%). RESULTATS: Sur 1254 questionnaires proposés, 438 réponses ont été recueillies. Quelque soit leur lieu d'exercice, les praticiens connaissent bien les signes évocateurs de DT1 (88% citent au moins 3 signes) mais mal sa définition biologique (9% la connaissent parfaitement). Il existait des différences entre pratique urbaine et rurale, concernant l'équipement en tests diagnostiques immédiats (56,9% en rural contre 47,9% en urbain équipés de 2 dispositifs, p=0,028) et le recours aux urgences (plus fréquent pour les urbains, p<0,001). On ne retrouvait pas de différence d'orientation des patients, selon la connaissance du potentiel létal de l'ACD (56,8% de ceux qui connaissent le risque vital associé, adressaient leurs patients aux urgences contre 43,4% de ceux qui ne le connaissaient pas, p=0,32). CONCLUSION: La mauvaise connaissance de la définition du DT1 et de sa gravité entraîne un retard diagnostique et thérapeutique potentiellement fatal. Les campagnes de prévention devront être axées sur ces deux pointsAIX-MARSEILLE2-BU Méd/Odontol. (130552103) / SudocSudocFranceF

SYNDROME HYPOTHALAMIQUE IDIOPATHIQUE DE L'ENFANT (DES PEDIATRIE)

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Résultats et évaluation des pratiques après un an de prise en charge d'enfants diabétiques par pompe à insuline

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Evaluation des arrêts de traitement par pompe à insuline en pédiatrie (étude rétrospective des patients suivis au sein de la région PACA et Languedoc-Roussillon)

OBJECTIF: le traitement par pompe à insuline est de plus en plus fréquent notamment chez les plus jeunes. Cependant certains décident d'arrêter le traitement après un délai plus ou moins court, représentant un surcout financier, une perte de temps pour les équipes soignantes ainsi qu'une perte du gain métabolique pour l'enfant. L'objectif de notre étude a été d'identifier les facteur conduisant à ces arrêts précoces et de proposer une démanche préalable à l'instauration d'un tel traitement. METHODES: Il s'agit d'une étude rétrospective multicentrique menée dans 6 centres de la région APCA et Languedoc Roussillon (Aix-en-Provence, Avignon, Hyères, Marseille, Nice, Palavas-les-Flots) sur la population pédiatrique diabétique de type 1 traitée par pompe à insuline et ayant arrêté le traitement au plus tard le 21 décembre 2011. RESULTATS: 473 enfants diabétiques ont été traités par pompe à insuline soit 31,8% des enfants diabétiques dans ces centres. Parmi ces enfants, 53 ont arrêté le traitement par pompe soit 11,2% d'arrêt. L'âge moyen d'instauration du traitement par pompe était de 10,9 +- 4,2 ans. L'arrêt du traitement est intervenu après une durée moyenne sous pompe de 1,7 +- 1,3 ans dont 15% dans les 6 premiers mois. Les motifs d'arrêt ont été le contrôle métabolique insuffisant dans 49% des cas, la demande de l'enfant dans 39% des cas, les lésions cutanées et problèmes techniques représentant chacun 6%. Le taux d'arrêt a été plus important dans les centres n'ayant pas d'infirmières d'éducation à temps plein (p=0,027); lorsque le traitement par pompe a été instauré après l'âge de 10 ans (p=0,02) et plus important chez les filles mais sans différence statistiquement significative 13,3% vs 8,8% pour les garçons (p=0,120). CONCLUSION: Trois facteurs sont prédictifs d'arrêt à savoir l'âge, l'encadrement et le sexe. La décision de mise en place d'un traitement par pompe à insuline nécessite une consultation multidisciplinaire, ainsi qu'un étayage familial et une compliance suffisanteAIX-MARSEILLE2-BU Méd/Odontol. (130552103) / SudocSudocFranceF

Hypopituitarisme congénital (description phénotypique et analyse génétique de 990 patients)

INTRODUCTION: L'ontogenèse hypophysaire est régie par l'expression en cascade de facteurs morphogènes et de transcription dont les mutations sont responsables de certains cas d'hypopituitarismes congénitaux. Une grande hétérogénéité phénotype rend difficile l'étalbissement d'une stratégie d'identification des anomalies génétiques chez ces patients. OBJECTIFS: 1) décrire une large cohorte de patients avec hypopituitarisme; 2) définir la prévalence des mutations et les caractéristiques phénotypiques des patients pour chaque gène considéré; 3) proposer une stratégie d'analyse génétique utile au clinicien. METHODES: Les données phénotypiques de 990 patients du réseau international Genhypopit étaient recueillies à partir d'un formulaire standardisé. Dix gènes ont été analysés (HESX1, LHX3, PROP1, POU1F1, TBX19, OTX2, PITX2, PROK2 et PROKR2) pour des sous-groupes de patients selon leur phénotype. RESULTATS: Le diagnostic déhypopituitarisme était le plus souvent réalisé pendant la période pubertaire et l'axe somatotrope était le plus fréquemment atteint (85,7%). L'hypopituitarisme était associé à des malformations extra hypophysaires pour 380 patients, 29,4% présentant un syndrome d'interruption de tige pituitaire (SIT) et 10,9% une anomalie ophtalmologique. Parmi les 934 cas index, la prévalence des anomalies géniques était de 7,9% (27,6% pour les 141 cas familiaux). Les patients avec phénotype hypophysaire pur présentatient 48 mutations (31 PROP1, 2 POU1F1 et 15 TBX19). Les anomalies identifiées pour les patients avec malformations extra hypophysaires comprenaient 9 causes géniques de SIT (3 LHX4, 4 HESX1 et 2 PROPK2), 1 mutation d'OTX2 chez un patient présentant une microphtalmie et 3 mutations de LHX3 dont une en contexte de surdité mais aucune présence d'anomalie de rotation du cou [ ]AIX-MARSEILLE2-BU Méd/Odontol. (130552103) / SudocSudocFranceF

Mécanismes physiopathologiques des hypopituitarismes congénitaux multiples

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